Elabscience生物素標(biāo)記試劑盒提供了標(biāo)記所需的全部試劑,能簡(jiǎn)單有效地對(duì)含有伯氨基(-NH2)分子的蛋白標(biāo)記。那么你知道Elabscience生物素標(biāo)記試劑盒有哪些常見問(wèn)題嗎?該如何解決呢?讓我們一起來(lái)看看吧!
一、蛋白上wan全沒(méi)有標(biāo)記上生物素
1. 不恰當(dāng)?shù)牟僮鳎缟锼睾偷鞍孜磜an全混勻,蛋白中的含有過(guò)量的銨離子或者氨基成分,或者其他誤操作。解決方法:設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照。
2. 生物素保存不當(dāng)。解決方法:未標(biāo)記之前,生物素中不可混入水分,取生物素時(shí),平衡至室溫約 5~10 min 后再開封。
3. 超濾管使用不當(dāng)。解決方法:超濾完后,濾芯中液體較少,不要使用移液器直接吸取超濾管芯中的樣品,應(yīng)倒置后離心出樣品。
4. 因離心機(jī)的差異,超濾時(shí)轉(zhuǎn)速過(guò)高。解決方法:離心機(jī)轉(zhuǎn)速為12000×g,非 12000rpm。
5. 超濾管漏液。解決方法:超濾管芯不要裝過(guò)多液體導(dǎo)致溢漏。
二、較低的蛋白回收率
1. 標(biāo)記過(guò)程中蛋白發(fā)生聚集沉淀。解決方法:添加 1M Tris 及時(shí)終止反應(yīng)。
2. 超濾濃縮時(shí)蛋白濃度過(guò)大。解決方法:一支超濾管芯不要裝入過(guò)多的蛋白,如 1 mg以上的蛋白。
3. 蛋白在標(biāo)記緩沖液中溶解度不高。解決方法:換用其他標(biāo)記蛋白試劑盒。
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